杂交袋做法
杂交袋的做法有多种,以下提供几种常见的杂交袋制作方法及其用途:
RNA滤膜杂交袋
使用5×SSPE浸湿RNA滤膜。
将浸湿的RNA滤膜转移至塑料袋中,塑料袋四周封口并剪去一角。
预热预杂交液至42℃,通过塑料袋开口处加入预热的预杂交液,并确保无气泡。
在42℃水浴摇床中温育2~4小时,或放入42℃烤箱中温育2~4小时。
变性探针后,将预杂交液倒入Falcon试管中,加入探针,并轻轻混匀。
将杂交液加入装有滤膜的塑料袋中,压出气泡并封好袋口。
在42℃水浴摇床中温育12~16小时,或放入42℃烤箱中温育12~16小时。
杂交完毕后,将杂交液倒入Falcon试管中,并将滤膜转移至盘中进行清洗。
使用缓冲液漂洗滤膜,并进行放射性自显影。