培养皿的做法
培养皿的做法主要包括以下步骤:
准备工作
将要用到的试剂瓶放到工作区合适的位置,并将即将要用的试剂瓶盖子松开。
把培养皿放在工作区的中心。
加试剂
拿掉试剂瓶的瓶盖,用吸管从试剂瓶中吸出试剂。
在培养皿一边的基底部注入培养基。
将培养皿的盖子盖上。
把培养皿放到原来放置的一侧,注意不要让培养基进入到盖子和底部之间的微小空间。
将用过的吸管取出。
倒平板
将若干无菌培养皿叠放在左侧,便于拿取。
点燃煤气灯,将火焰调到适中(空气不要太大,以免气流过急)。
倒平板时,先用左手握住锥形瓶的底部,倾斜锥形瓶,用右手旋松棉塞,然后用右手的小指和手掌边缘夹住棉塞并将它拔出(切勿将棉塞放在桌面上),随之将瓶口周缘在火焰上过一下(不可灼烧,以防爆裂,以杀死可能沾在瓶口外的杂菌)。然后将锥形瓶从左手传至右手中(用右手的拇指、食指和中指拿住三角瓶的底部),在这操作过程中瓶口应保持在离火焰2~3cm处,瓶口始终向着火焰。左手拿起一套培养皿,用中指、无名指和小指托住培养皿底部,用食指和大拇指夹住皿盖并开启一缝,恰好能让三角瓶伸入,随后倒出培养基。一般约倒入12ml的培养基即可铺满整个皿底。盖上皿盖,置水平位置等凝。然后再将三角瓶移至左手,瓶口再次过火并塞紧棉塞。
冷凝方法
平板培养基的冷凝方法有两种,一种是将平板一个个摊开在桌面上冷凝,另一方法是将几个平板叠在一起冷凝。前者冷凝速度较快,在室温较高时采用;而后者冷凝速度较慢,可在室温较低时采用,其优点是形成冷凝水少,尤其适用于平板划线等的需要。
细胞爬片
基质细胞为贴壁生长,故在培养时需制作细胞爬片,即在加有液体培养基的培养皿里事先放置一块极薄的盖玻片,以便基质细胞在盖玻片上贴壁生长,基质细胞长满盖玻片后用小镊子将盖玻片取出,进行后续试验,例如免疫组化,细胞划痕,激光共聚焦等等。
密封处理
微生物培养皿在接种营养基后,需要使用保鲜条密封盖体和皿体的连接处,以实现盖体和皿体的紧密扣合,防止外部微生物进入培养皿内,保证微生物培养过程中的无菌环境。
特殊设计
状环形皿包括皿体和皿盖,皿盖罩扣于皿体上;所述皿体为底壁、主侧壁和次侧壁三个部分一体成型结构,主侧壁和次侧壁设置于底壁上,次侧壁位于主侧壁的内侧,主侧壁和次侧壁之间形成外环,次侧壁的中间形成中间孔;在培养皿的外环内设置外环隔板,将外环分割成不同的独立区域空间。
这些步骤涵盖了从准备到使用培养皿的整个过程,确保培养皿在实验中的有效性和无菌性。根据具体的实验需求,可以选择合适的方法进行操作。